重複せずに三胚葉を蛍光標識可能なTRiCKマウス

RIKEN BRC April 2022
Mouse of the Month

重複せずに三胚葉を蛍光標識可能なTRiCKマウス

B6(Cg)-Gt(ROSA)26Sor<em1(CAG-venus,-mCherry,-mCerulean)Okn>/26 (RBRC10966)
B6(Cg)-Sox1<em1(cre)Okn> T<em1(dre)Okn> Sox17<em1(phiC31<*>)Okn>/2-3 (RBRC10967)

A)E15.5胚、B)8週齢個体の全脳

TRiCKマウスにおける三胚葉標識性蛍光タンパク質の発現様式。RBRC10966およびRBRC10967の掛け合わせにより、レポーター遺伝子カセットを1アレル保有するF1個体では、発生の分化系譜に従って各胚葉由来細胞は蛍光タンパク質を1種類のみ発現する。緑(神経系外胚葉):sox1-cre/Venus、赤(中胚葉):T/brachyury-dre/mCherry、シアン(内胚葉):sox17-phiC31o/mCeruleanを示す。
(A) E15.5胚、(B) 8週齢個体の全脳。

今回ご紹介するTRiCK(TRiple Coloured germ layer Knock-in)マウスは、自己切断性2Aペプチドと部位特異的組み換え酵素、蛍光タンパク質を組み合わせることにより、初期胚を構成する三胚葉を独立かつ同時に標識可能な系統です。このシステムは、内在性のROSA26プロモーターと外来性のCAGプロモーター制御下で、部位特異的組み換え酵素(Cre/Dre/phiC31o)の発現誘導によって蛍光シグナル(Venus/mCherry/mCerulean)を発するレポーター系統(RBRC10966)と、外胚葉マーカーSox1制御下でCreを、中胚葉マーカーT(Brachyury)制御下でDreを、内胚葉マーカーSox17制御下でpChiC31oを発現する胚葉ラベリング系統(RBRC10967)との掛け合わせにより実現します。TRiCKマウスの解析に合わせて最適化された組織固定化法、組織透明化法も報告されており、初期胚発生過程だけでなく、成体組織においてもTRiCKシステムが機能することが明らかになっています。このことから、TRiCKマウスは、発生・再生現象や病態発生過程の解明に有用な系統であるといえます。

 

Depositors : 岡野 栄之 先生、芹澤 崇 先生
慶應義塾大学
Strain name : B6(Cg)-Gt(ROSA)26Sor<em1(CAG-venus,-mCherry,-mCerulean)Okn>/26
RBRC No. : RBRC10966
Strain name : B6(Cg)-Sox1<em1(cre)Okn> T<em1(dre)Okn> Sox17<em1(phiC31<*>)Okn>/2-3
RBRC No. : RBRC10967
Reference : Serizawa T, Isotani A, Matsumura T, Nakanishi K, Nonaka S, Shibata S, Ikawa M, Okano H.
Developmental analyses of mouse embryos and adults using a non-overlapping tracing system for all three germ layers.
Development. 2019 Nov 4;146(21):dev174938.
Related mouse strains in RIKEN BRC : B6(Cg)-Sox1<em1(cre)Okn> (RBRC10968)
B6(Cg)-T<em1(dre)Okn> (RBRC10969)
B6(Cg)-Sox17<em1(phiC31 <*>)Okn> (RBRC10970)
Utilized cell resource from RIKEN BRC : Mouse embryonic stem cell line B6NJ-22^(UTR) (AES0141)
Utilized DNA resources from RIKEN BRC : pCAGGS-Cre (RDB08998)
B6N Mouse BAC clone (RDB07573) / B6Ng01-316F09, B6Ng01-307M06, B6Ng01-307A03, and B6Ng01-211A18)

 

April 2022
Saori Mizuno, Ph.D.
Contact: Experimental Animal Division, RIKEN BioResource Research Center (animal.brc@riken.jp)
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